CHIPSeq的原理和應用

2021-07-06 11:31:52 字數 644 閱讀 1091

染色質免疫共沉澱技術(chipseq,也稱結合位點分析法,是研究體內蛋白質與相互作用的有力工具,通常用於轉錄因子結合位點或組蛋白特異性修飾位點的研究。將與第二代測序技術相結合的技術,能夠高效地在全基因組範圍內檢測與組蛋白、轉錄因子等互作的區段。

chipseq的原理是:首先通過染色質免疫共沉澱技術(特異性地富集目的蛋白結合的片段,並對其進行純化與文庫構建;然後對富集得到的片段進行高通量測序。研究人員通過將獲得的數百萬條序列標籤精確定位到基因組上,從而獲得全基因組範圍內與組蛋白、轉錄因子等互作的dna區段資訊。

對客戶提供的樣品(如果有陰陽參啟動子區域或序列的)進行定量檢測,檢測合格後進行測序文庫構建、成簇(cluster generation)擴增、高通量測序。基本資料分析資料產出統計:對測序結果進行影象識別(base calling),去除汙染及接頭序列;統計結果包括:測定的序列(長度、數量、資料產量。標準高階資料分析內容包括:chipseq序列與參考序列比對;

peak caling:

統計樣品peak資訊(峰檢測及計數、平均峰長度、峰長中

深度;給出每個樣品吳聯基因列表及go功能注釋;在多個樣品間,對與

關聯基因做差異分析。

ChIP seq產生的檔案 解讀

其中各列名稱的含義 xls中的座標是基於1的,與bed格式不同。要注意的是xls裡的座標和bed格式的座標還不一樣,起始座標需要減1才與narrowpeak的起始座標一樣。上篇文章中所有的圖都是利用這個檔案作出來的 peaks.narrowpeak檔案是bed6 4格式,可以上傳到ucsc瀏覽。該檔...

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