PCR(聚合酶鏈式反應)技術的基本原理

2022-05-08 12:06:10 字數 497 閱讀 9358

pcr(聚合酶鏈式反應)技術的基本原理

類似於dna的天然複製過程,其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。pcr由變性→退火→延伸三個基本反應步驟構成:

①模板dna的變性:7a686964616fe78988e69d8331333366303738模板dna經加熱至93℃左右一定時間後,使模板dna雙鏈或經pcr擴增形成的雙鏈dna解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備。

②模板dna與引物的退火(復性):模板dna經加熱變性成單鏈後,溫度降至55℃左右,引物與模板dna單鏈的互補序列配對結合。

③引物的延伸:dna模板--引物結合物在72℃、dna聚合酶(如taqdna聚合酶)的作用下,以dntp為反應原料,靶序列為模板,按鹼基互補配對與半保留複製原理,合成一條新的與模板dna鏈互補的半保留複製鏈。

重複迴圈變性→退火→延伸三過程就可獲得更多的「半保留複製鏈」,而且這種新鏈又可成為下次迴圈的模板。每完成乙個迴圈需2~4分鐘,2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。

SnapGene教程 聚合酶鏈式反應 PCR

什麼是pcr?聚合酶鏈式反應 pcr 有時也稱 分子影印 molecular photocopying 是一種快速且低成本的技術,用於擴增 複製dna的小片段。由於分子和遺傳分析需要大量的dna樣本,因此如果不進行pcr擴增,幾乎不可能對分離的dn 段進行研究。pcr通常被譽為分子生物學最重要的科學...