磷酸鹽緩衝液(簡稱pbs)的是生物化學中常用的一種阻礙溶液ph變化的緩衝溶液,這種由鹽溶液中含有氯化鈉,磷酸鹽,磷酸鹽,和磷酸鉀組成。組份濃度:137 mm 氯化鈉,2.7 mm ,10 mm 磷酸二氫鈉,2 mm 。本文總結了pbs和d-pbs溶液的配製方法。
1. 常規pbs磷酸鹽緩衝液
組成成份:
34 g
1 mol/l氫氧化鈉溶液 175 ml
蒸餾水 825 ml
ph 7.2
配製:先將磷酸鹽溶解於500 ml蒸餾水中,用1 mol/l氫氧化鈉溶液校正ph後,再用蒸餾水稀釋至1000 ml。
稀釋液:
取儲存液1.25 ml,用蒸餾水稀釋至1000 ml。分裝每瓶100 ml或每管10 ml,121 ℃高壓滅菌15 min。
用途:主要用於一些化學實驗中不影響實驗反應的情況下調節ph值,以便讓實驗的化學反應在最佳條件下進行。部分用於食品或是飼料行業加工,如食品或者飼料真菌毒素檢驗中elisa方法的洗板應用或者食品微生物檢驗中的稀釋緩衝液。
2. pbs buffer的配製具體步驟
組份濃度:
137 mm nacl, 2.7 mm kcl, 10 mm na2hpo4, 2 mm kh2po4
配製量:
1 l配製方法:
(1)稱量下列試劑,置於1 l燒杯中。
nacl 8 g
kcl 0.2 g
na2hpo4 1.42 g
kh2po4 0.27 g
(2)向燒杯中加入約800 ml的去離子水,充分攪拌溶解。
(3)滴加濃鹽酸將ph值調節至7.4,然後加入去離子水將溶液定容至1 l。
(4)高溫高壓滅菌後,室溫儲存。
注意:上述pbs buffer中無二價陽離子,如需要,可在配方中補充1 mm cacl2和0.5 mm mgcl2。pbs配方
3. d-pbs是杜氏磷酸緩衝液
全稱為:dulbecco's phosphate buffered saline
組分 分子量 濃度 (gm/l) 摩爾濃度 (mm)
(kcl) 75 0.20 2.67
(kh2po4) 136 0.20 1.47
氯化鈉 (nacl) 58 8.00 138.00
磷酸氫二鈉 (na2hpo4) 142 1.15 8.10
ph值為7.4。
(1)杜氏磷酸鹽緩衝液(dulbecco's phosphate buffered saline,d-pbs)也是一種磷酸鹽緩衝液,與常規pbs的不同之處在於磷酸鹽的含量稍低些,並含有鈣鎂離子。d-pbs主要用於胚胎學方面的研究,多用於胚胎的沖洗液、凍存液和培養液。
(2)d-pbs配方:氯化鈉8 g,0.2 g,磷酸氫二鈉1.15 g,0.2 g,氯化鈣0.1 g,含6個結晶水的氯化鎂0.1 g溶於1 l ddh2o中。
(3)以上配方為含有鈣鎂離子的d-pbs,如不加氯化鈣和氯化鎂,即為無鈣鎂的d-pbs。
(4)在以上配方的基礎上,還可以加入葡萄糖、酸鈉等,以更利於培養物的生長。pbs配方
d-pbs是杜氏磷酸緩衝液,也是一種磷酸鹽緩衝液,與常規磷酸緩衝液最大的不同點在於磷酸鹽的含量稍低些,根據是否含鈣鎂分為兩種即d-pbs w/鈣 & 鎂和d-pbs w/o 鈣 &鎂
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