從乙個點光源（laser）發射的探測光通過透鏡聚焦到被觀測物體上，如果物體恰在焦點上，那麼反射光通過原透鏡應當匯聚回到光源，這就是所謂的共聚焦，簡稱共焦。共焦顯微鏡在反射光的光路上加上了一塊二向色鏡（dichroic mirror），將已經通過透鏡的反射光折向其它方向，在其焦點上有乙個帶有「針孔」（pinhole），小孔就位於焦點處。可以想像，探測光焦點前後的反射光通過這一套共焦系統，必不能聚焦到小孔上，會被擋板擋住。於是光度計測量的就是焦點處的反射光強度。其意義是：在任何時候，都只能獲得一小部分光點，因此，在顯微鏡中，任何時候都不會產生完整的影象。通過移動透鏡系統，逐點掃瞄，可以對乙個半透明的物體進行三維掃瞄。
對於一枚硬幣，在移動透鏡系統的過程中，其焦距是不變的，因此，對於一些非平面的部分，它其實是在焦點外的，因此反射到檢測器的光強就很弱。因此光強的強弱表示的是深度資訊。得到的原始資料成為z堆疊，是1360102431 其中10361024是解析度。而31是將300um的高度分成31份，即每張13601024，都是在焦距移動乙個等級時得到的。每個畫素點的值其實是強度。
強度和焦點與物體之間的距離有著對應關係：
i是強度，z是焦點與物體的距離，a是常數。
設定乙個0.5 i 的閾值，去除雜訊以及增強魯棒性。
因此，對於的乙個畫素點，其實有31個值，每個值都對應著不同的高度而獲取的強度。
即如果我們選取這31個點中的最大值，也就是光強最大的那個，將其對應的高度作為那個畫素點的高度。這種演算法對隨機雜訊的敏感度最高。
自動聚焦 顯微鏡的景深
圖1 顯微鏡 鏡座 支援 穩定作用 鏡柱 支援作用 鏡臂 連線作用 可以手握旋轉，便於觀察 細準焦螺旋 公升降鏡筒 粗準焦螺旋 公升降鏡筒 鏡筒 連線目鏡與物鏡 轉換器 調換物鏡 目鏡 放大影象 圖2 目鏡 物鏡 放大影象 圖3 物鏡 載物台 放置玻片 通光孔 光線通過 壓片夾 固定玻片 遮光器 調...
體視顯微鏡與生物顯微鏡
體視顯微鏡也叫做立體顯微鏡 stero microscope 與生物顯微鏡 物顯微鏡 url biological microscope 主要區別如下 一 體視顯微鏡的工作距離較大，通常可以達到50mm甚至150mm 而生物顯微鏡的檢測物體的工作距離範圍很少超過20mm。二 體視顯微鏡可以放置較高，...
光學顯微鏡油鏡的使用
光學顯微鏡油鏡的使用 在顯微鏡中，更換物鏡後不必轉動粗調旋鈕，只要稍稍調節細調旋鈕就可以聚焦。並且由於干係物鏡較長的工作距離，它們的使用不存在多大問題，但是對於浸潤物鏡使用中的一些問題，有必要加以簡要的敘述。在奧林巴斯顯微鏡油鏡的使用中，由於這種物鏡很短的自由工作距離和很小的場深，使得物像的聚焦成為...