於sy5y分化過程中施加rtms，當其分化成功後，檢測動作電位（active potential， ap）。檢測ap前存在乙個關鍵的問題----sy5y 分化成功的鑑定。
近期讀的文章，多是關於agent誘導sy5y分化的。我著重關注了誘導分化的具體步驟和檢測的物質。就目前接觸到的文章而言，提到的成熟神經元的標誌物包括但不侷限於：生長相關蛋白（growth-associated protein ，gap-43)、 神經元核抗原（neuronal nuclei ，neun),、突觸素蛋白（synaptophysin ，syn)、突觸泡蛋白（synaptic vesicle protein ii ，sv2)、突觸相關蛋白-97（sap–97）、 神經特異性烯醇化酶（neuron specific enolase ，nse) 、 微觀相關蛋白（icrotubule associated protein ，map)和神經絲蛋白（tau）。儘管不同的研究者測量的指不同，但上述物質是神經元特異性標誌是公認的。ra誘導sy5y分化前後，通過化學免疫染色發現，sy5y分化後神經特異性烯醇化酶（neuron specific enolase ，nse)分布狀態發生變化。由原來主要分布於細胞體質中，後在胞體和突觸中的分布增加；或分化後染色呈陽性。分化後，胞體和神經突處的突觸素蛋白（synaptophysin ，syn)螢光強度顯著增加。分化後，胞體和神經突處的突觸相關蛋白-97（sap–97）螢光強度顯著增強；神經絲蛋白（tau）分化前幾乎不存在，分化後顯著增加。多篇文章提到neun/map2是成熟神經元的特異性物質，分化後的sy5y用514抗體染色顯示，分化的sy5y細胞與原代培養神經元幾乎相似，western-blot檢測map2的含量發現，分化後其含量顯著增加。
從形態學上分析，分化後的sy5y擁有廣泛的神經突。一般認為，當突起長度大於50μm時，認為該細胞分化成功。
綜上所述，接下來的實驗中，可以生化方面選擇map2、syn作為測量指標，通過染色觀測其分布鑑別分化成功與否；從形態學的角度講，在尼康倒置顯微鏡下觀測細胞形態，測量神經突起的長度判斷細胞分化狀態。
總體的實驗思路是從巨集觀到微觀，先**rtms對神經細胞增殖、分化、凋亡的作用。涉及到的實驗技術包括mtt增殖檢測、he染色、免疫螢光染色、電生理膜片鉗等。下一步**具體的分子機制，包括各種特異性物質的表達水平等。前期的實驗只需將sy5y誘導為神經元細胞即可，後期的實驗因不同的誘導劑介導不同的神經表型，因此要注意誘導劑的選擇。
3月13號之前需要解決的問題是：
1. 確定要檢測的物質；
2. 檢視實驗技術及需要的藥品、試劑等；
3. sy5y誘導分化的具體操作：ra的配製、培養基中血清濃度的選擇、ra誘導時間；
4. rtms刺激引數的選定；
日本首次利用IPS細胞分化成免疫細胞應用於癌症治療
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