免疫組織化學（簡稱免疫組化）是組織化學的一種，它是利用已知的特異性抗體或抗原能特異性結合的特點，通過化學反應使標記於結合後的特異性抗體上的顯示劑，如酶、金屬離子、同位素等，顯示一定的顏色，並借助顯微鏡觀察其顏色的變化，從而在抗原抗體結合部位確定組織、細胞結構的化學成份或化學性質。
實驗過程包括切片製作（固定，脫水，透明，包埋，切片，貼片，烤片），脫蠟，水化，阻斷，抗原修復，封閉，一抗孵育，二抗孵育，顯色，復染，封片，分析。
實驗過程常見問題如檢測結果陰性，非特異性染色，染色強度不夠，著色不均，脫片，干片等。一起來看案例解析，助您高效做出準確實驗結果。
1 標本的固定
常見問題：
組織固定不及時或不完全固定,he染色細胞核發灰模糊，對比不鮮明；免疫組化染色結果不理想，通常組織離體2h後抗原完全丟失。
範例1檢測組織：人淋巴結組織石蠟切片
檢測：cd45染色
問題：組織固定不充分，淋巴結邊緣淋巴細胞cd45染色強陽性，組織內部淋巴細胞cd45染色弱陽性，染色不均。
範例2檢測組織：腎臟組織石蠟切片
檢測：he染色
問題：固定不及時或固定不完全，細胞核模糊，對比不鮮明。
建議：1、組織離體後盡快固定，組織塊大小為15×15×5mm，切開固定效果好；
2、固定液以10％中**爾馬林緩衝液為佳；
3、固定時間在4h-24h之間，長時間固定會影響抗原決定簇的暴露，產生陰性結果；
4、固定液的量要超過組織體積5倍以上。
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