1. 培養基的配製
第一次亞轉殖,一般用ht完全培養基(含1×ht和20%胎牛血清的1640完全培養基),配製方法:20%胎牛血清+1%雙抗(鏈黴素和青黴素,100×)+1/50體積的ht(50×)+1640不完全培養基。
2. 飼養細胞的準備
(frdbio,mcc0014)。www.friendbio.com
3. 細胞亞轉殖
教科書和參考資料一般是建議將細胞稀釋到平均每孔0.8個細胞,此時含有單個細胞的孔的概率最高;但是,這個方法並不科學,原因是不同實驗體系對細胞生長的支援並不一樣,並不是每孔單細胞都可以順利存活成長起來,所以,每個實驗室需要根據自己的實驗體系測試最佳的單孔平均細胞個數。
陽性細胞稀釋到平均每孔某個確定的個數,分種到含有飼養細胞的96孔板裡,置於5% co2 37℃細胞培養箱中培養,5天左右觀察,選取只含有單集落細胞孔進行上清檢測;如果單集落孔達到50%以上,且所選擇的單集落孔檢測的結果為100%陽性即可認為此細胞為單轉殖細胞株,以雜交瘤細胞原始孔編號為其命名。將亞轉殖後的細胞株放大,可進行腹水生產。如果檢測結果達不到100%陽性則需要從本次亞轉殖所獲得細胞株中陽性值最高的孔繼續進行第二次亞轉殖。
亞轉殖得到的細胞株需要進行多種實驗條件的驗證,elisa驗證只能算是篩選;常見的實驗驗證條件有免疫印跡(western blot),免疫螢光(if)、免疫組化(ihc)等等,如果要進行下游產品開發還需要進行進一步實驗.
什麼是磁碟轉殖軟體?為什麼需要它?
轉殖就是乙個副本。現在已經有轉殖羊的實現,也許某一天人類也會被轉殖。但是這裡所說的磁碟轉殖有更重要的意義,它是乙個可以管理和保護資料的重要工具。讓我們來看下磁碟轉殖軟體可以做什麼。先從基本知識開始。基本上來說,磁碟轉殖是乙個將每個位元組的資訊從乙個計算機磁碟上完整複製到另乙個磁碟上的過程。通常,第乙...
轉殖虛擬機器後需要修改的設定
相同配置內容刪掉只保留最後乙個 最後乙個eth?無論是幾都修改為0 修改 假設 eth2 eth0 4.修改轉殖出的虛擬機器的名字 root node01 vi etc sysconfig network networking yes hostname node002 5.設定dns 網域名稱解析器...
轉殖虛擬機器後需要修改的配置
問題描述 有時候為了方便,我們可以直接在windows本機上覆制整個虛擬機器資料夾,完成虛擬機器轉殖,本實驗將虛擬機器11gnode1轉殖,生成11gnode2,從而擁有多個實驗環境。但是如此轉殖後,兩台虛擬機器的配置資訊完全相同,物理上沒有獨立,遠端連線不上,ping不通,要想兩台虛擬機器都可用,...