實驗案例1：泳道高背景問題分析：多條帶以及高背景集中在泳道上，大概率是樣本時間太久，或者蛋白酶抑制劑沒加發生了蛋白降解，或者是組織樣本中，成分太複雜，加上抗體特異性一般造成的。
問題診斷
1. 樣本時間太久
2. 組織樣本背景高
3. 蛋白酶抑制劑/磷酸酶抑制劑沒有加
建議方案
新鮮製備樣本，加入蛋白酶抑制劑。對於組織樣本，要求超聲。對於特異性一般的抗體，先用細胞樣本做下。實驗案例2：全膜高背景問題分析：像這種全膜的高背景，大概率是緩衝液的問題。可以提高封閉液濃度和封閉時間，抗體稀釋液使用5%脫脂牛奶或者根據說明書要求來，洗滌的tbst增加nacl濃度以及吐溫濃度，增加洗滌的次數和時間。
問題診斷
1. 封閉液
2. 抗體稀釋液
3. 洗滌
建議方案
封閉液使用5%脫脂牛奶（新鮮配置），4度封閉過夜。抗體稀釋液使用5%脫脂牛奶，tbst中nacl濃度增加至500mm，吐溫增加至0.5%，洗滌15min*3次或者10min*4次。
ps：這個case客戶本來使用1%bsa稀釋抗體，換用5%bsa，背景就沒問題了實驗案例3：全膜高背景問題分析：排除二抗非特異性，就是不加一抗，直接加二抗孵育，看是否有非特異性條帶，對於一般客戶來說，更換二抗是更加簡便的方法。（能拿結果，不僅僅驗證），二抗稀釋液強烈推薦5%脫脂牛奶，如果前兩者都無法改善結果，考慮一抗非特異性。
問題診斷
1. 二抗非特異性
2. 抗體稀釋液
3. 一抗非特異性
建議方案
更換二抗，排除二抗非特異西，二抗稀釋液使用5%脫脂牛奶，更換一抗。
更換二抗後【如左圖】實驗案例4：高背景、雜帶問題分析：全膜的背景問題，主要是一抗二抗未洗滌乾淨，基本殘留在膜上。
問題診斷
1. 洗滌不充分
建議方案
tbst中nacl濃度增加至500mm，吐溫增加至0.5%，洗滌15min*3次或者10min*4次
優化後結果【如左圖】實驗案例5：條帶過粗、雜帶問題分析：條帶過於粗往往是因為樣本上樣量太高，一抗濃度高，加上**時間久。
問題診斷
1. 樣本訊號太強
2. 雜帶多
3. **時間太久
建議方案
減少上樣量，減少一抗濃度，減少**時間。
優化後結果【如左圖】實驗案例6：不出帶問題分析：一般沒條帶的主要關注樣本表達量，文獻或者看上下游蛋白結果，如果是磷酸化的，還要看上下游的磷酸化。對於大分子量（150kd以上）或者小分子蛋白（小於20kd），看下麗春紅染色，確認轉膜效率。抗體濃度和**時間幫助增強訊號。
問題診斷
1. 樣本表達量和處理方式
2. 轉膜
3. 抗體濃度
4. **時間
建議方案
增加上樣量，使用合適的刺激處理方式，增加陽性對照，增加一抗濃度，增加**時間。
*抗體稀釋液選擇方法*預製膠在wb實驗中的應用*核酸預製膠，wb實驗好幫手
實驗3實驗報告
遲到的實驗3實驗報告 實驗結論 練習1 先用記事本編輯彙編源程式並儲存 然後進行編譯和鏈結得到可執行檔案 編譯和鏈結時結尾加分號可以跳過一些一般情況下預設的步驟，方便一次性生成目標檔案 執行將line4和line9中暫存器dl的值分別修改為6和8 重新彙編鏈結執行，可以發現執行的結果變成了我們所修改...
實驗報告 《3》
編寫基於物件的程式。資料成員包括長寬高，體積，要求用成員函式實現下面的功能 1 由鍵盤輸入3個長方柱的長 length 寬 width 高 high 2 計算長方柱的體積 volume 和表面積 areas 3 輸入這3個長方柱的體積和表面積。html view plain copy print?i...
1209實驗3報告
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