最近，來自英國的超強變種更是讓世界變得更緊張起來。作為地球人，在這巨大的疫情陰霾下，新冠疫苗或許成了很多人眼中最後的救命稻草了吧！
當然，話說回來，所謂沒有對比就沒有傷害！還是很慶幸我們都生活在這片可愛的土地，起碼我們還可以順利地工作，還可以無憂地學習，不緊不慢地做著自己喜歡的事情，暢想著未來的美好！那麼，讓我們繼續努力充實自己吧！
今天三三將和大家一起來**的是和疫苗相關的「t細胞」。提到t細胞的大名，大夥肯定是比較熟悉的了，作為免疫細胞家族赫赫戰將，t細胞的相關應用可謂是百花齊放了！比如，pd-1/pd-l1抑制劑、car-t**、疫苗、單抗等。當然，吃水不忘挖井人，我覺得還是有必要先認識一下第乙個把t細胞帶給我們的人—jacques miller、max d.cooper。
2023年在伊麗莎·霍爾醫學研究所jacques miller在實驗中發現，切除胸腺之後的小鼠不會對來自另一品系的小鼠的**產生排異反應，由此證明了排異反應相關的免疫細胞形成於胸腺，這也是最早關於t細胞形成的記錄。但他的實驗並沒有得到廣泛的接受，直到2023年1月，兒科醫生和免疫學家max d.cooper等才利用大量的臨床觀察才正式證明了t細胞、b細胞的存在，並將成果發布在《自然》期刊上。
無論是b細胞還是t細胞的發現無疑是歷史性的，因為它們的發現不僅揭示了免疫學的重要謎團，並且為眾多藥物和疫苗的研發奠定了基礎。事實上，過去50年來免疫領域的所有基本發現都可以追溯到max d.cooper和jacques miller的開創性工作。他們歷史性的發現還推動了**新策略的產生——利用免疫細胞及其產物來對抗癌症、自身免疫病、免疫缺陷病等眾多疾病。可以說，jacques miller、max d.cooper的發現為現代免疫學開啟了大門。
然而，就兩人這樣歷史性的發現，相對於發現了同是免疫家族一員吞噬細胞的梅契尼科夫而言是不幸的。jacques miller、max d.cooper並沒有獲得諾貝爾獎的青睞。更別說，2023年諾貝爾生理學或醫學獎還頒給了癌症的免疫**方向，而這種**的原理正是通過釋放被癌細胞抑制的t細胞功能，來達到**癌症的目的。
雖然未獲得諾貝爾獎，但可以肯定的是t細胞等的發現絕對可以稱之為歷史性的重大發現。在過去幾十年裡，各種諸如pd-1/pd-l1抑制劑、car-t**、抑或是最近大家比較重視的新冠疫苗研發等，t細胞的相關免疫學應用研究可謂越來越熱。大量且大廣度地應用必然意味著t細胞的基礎性研究必然要越來越成熟，比如建立可支援t細胞體外發育的培養體系，穩定而高效地分離出高純度且活性不受影響的t細胞等。三三查閱了一些相關文獻後發現，關於t細胞的培養分離技術除了大家比較熟悉的磁珠分離法外，還有親和板結合分離法上花結形成分離法、補體介坤的細胞毒分離法、尼龍橇分離法、磁珠分離法和流式細胞術分離法等方法。為了方便大家在實際的實驗實踐研究中選擇性使用，下面對幾種方法進行對比說明：
方法學描述應用
親和板結合分離法直接法：用特異性抗體包被塑料平皿或培養板，表達特定膜抗原的細飽即與相應抗體結合而被吸附於平皿或培養板表面，懸液中為不表達特定膜抗原的細胞，改變緩衝液的離子強度，將結合在板上的細胞解離，獲得目的細胞。
簡捷、經濟；可同時進行細胞陽、陰性分選；收穫量大；親和板上細胞分離損傷；抗原抗體結合後可導致相應細胞被活化。
間接法：用第二抗體包被平皿．將預先與特異性單抗結合的淋巴細胞與之反應後，可吸附於平皿上·從而達到分離的目的。
e花結形成分離法e花結形成主要取決於細胞間受體配基的二維親和力和密度，long等在此基礎上建立了乙個概率模型．通過這個模型半定量地判定受體與配體間的親和力大小，從而可以作為評估人體內免疫狀態的參考。
檢測分析細胞的免疫水平和動態的變化
補體介導的細胞毒分離法l.ympho-kwik試劑是一種類似雞尾酒的混合試劑，含有單轉殖抗體和補體，在與將要分選的細胞混合後，能形成密度梯度通過抗體．抗原複合物活化補體去除b細胞和單核細胞達到分離t細胞的目的
會啟用和殺傷被抗體結合的細胞；適用於陰選分離法，去除非目的細胞。
尼龍毛分離法t 細胞尼龍毛分離法利用了尼龍毛對 b 細胞的親和力，從而使 t 細胞在沒有嚴重損傷的情況下達到的足夠的純度。
分離純度不高；**率低；現作為對細胞懸液初步純化的一種輔助手段，即在分選t細胞前用尼龍棉去除b細胞。
磁珠分離法用automacs系統進行總t細胞、cd4+細胞或cd8+t細胞的自動分離
儀器小巧，消毒方便，不需要專人操作，實驗流程對細胞損傷小，有極好的**率和存活率，分選細胞的有效方法
流式細胞術分離法四聚體技術能定量抗原特異性t細胞，通過置換四體複合物中的肽，可以檢測不同表位的t細胞。
室溫等外界條件，資料處理要求較高。流式細胞儀及其抗體都較昂貴。
其他李付廣等報道了細胞培養淘汰篩選法，該法是利用細胞在特定的培養基中死亡的時間不同而篩選純化出t細胞，
純度小，現應用較少
單細胞測序技術及應用進展
發表於 基因組學與應用生物學，2015 年，第34 卷，第5 期，第902 908 頁 本文講了什麼？細胞是生命的單位，然而大多數的人類基因組 癌症或其它研究仍然是通過從多個細胞中抽提dna 來進行測序，這忽略了細胞間的差異對於控制基因表達 細胞行為的影響，實驗結果往往表示的是細胞群體中訊號表達的均...
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圖1 細胞亞型的鑑定及分析 stegle et al.nature reviews genetics,2015 隨著單細胞測序技術的發展，每個研究或實驗中測定的細胞數量在顯著增加。現在很多單細胞研究中，少則產生幾百，多則產生幾十萬的細胞數量，甚至更多。其中，細胞亞型 cell subtype or ...
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自從2009年單細胞轉錄組測序 single cell rna seq，scrna seq 技術首次問世，至今已經有幾十種不同的scrna seq技術相繼被開發出來。在過去的十年裡，單細胞轉錄組測序技術得到了蓬勃的發展，從而使得可在單細胞水平揭示全基因組範圍內所有基因的表達情況，可以更精準的開展細胞...